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簡(jiǎn)要描述:蛋白交互作用分析系統主要用于生物學(xué)領(lǐng)域的冷光和熒光檢測波長(cháng)測定:如FRET(熒光共振能量轉移)分子設計的調查BRET(生物發(fā)光共振能量轉移)分子設計的調查熒光/冷光試劑的發(fā)展和質(zhì)量控制熒光/冷光反應的分析
品牌 | 其他品牌 | 產(chǎn)地類(lèi)別 | 進(jìn)口 |
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蛋白交互作用分析系統
品牌介紹:
ATTO株式會(huì )社成立于1964年,是日本zui大、世界zui著(zhù)名的電泳廠(chǎng)商之一,具有完整的常規電泳產(chǎn)品系列。作為日本*的電泳品牌,ATTO一直秉承著(zhù)“世界信賴(lài)的品質(zhì)”的精神,其產(chǎn)品憑借的精致和可靠的性能,具有了超越其他品牌產(chǎn)品的實(shí)力,成為小型電泳產(chǎn)品的。
ATTO株式會(huì )社同樣也是世界上zui早研制熒光發(fā)光儀器的廠(chǎng)家之一。隨著(zhù)人類(lèi)更深層次的探索生命的奧秘,熒光檢測已成為一種非常有效的手段。ATTO依托*的技術(shù)和強大的科研實(shí)力,連續開(kāi)發(fā)出多款的熒光檢測儀器,在應用上突破了傳統熒光儀器的局限性,把這項技術(shù)又提高到一個(gè)新的水平,滿(mǎn)足更高要求的科研工作要求。
蛋白交互作用分析系統
產(chǎn)品性能:
主要用于生物學(xué)領(lǐng)域的冷光和熒光檢測波長(cháng)測定:如
FRET(熒光共振能量轉移)分子設計的調查
BRET(生物發(fā)光共振能量轉移)分子設計的調查
熒光/冷光試劑的發(fā)展和質(zhì)量控制
熒光/冷光反應的分析
用途特征;
1. 分光功能;同時(shí)測定相同條件下的測量范圍內不同波長(cháng)的光
2. 一個(gè)冷CCD相機做為檢測器,通過(guò)調節曝光時(shí)間即可增加檢測靈敏度
LumiFL-Spectro capture用一個(gè)高靈敏度的冷CCD做檢測器,增加了靈敏度,同時(shí)有利于整個(gè)波長(cháng)范圍內的同時(shí)測量。這個(gè)單元是由光分離部分和檢測裝置做為基本結構;同時(shí),如果客戶(hù)需要測量的樣品是靠熒光激發(fā)的,還能連接熒光激發(fā)光源進(jìn)行測定(可選:請在要求中注明)。熒光樣品的測定可以用石英材質(zhì)的容器,冷光樣品可以用塑料的小離心管。
硬件特征:
1、電子的冷CCD相機做為檢測器
2、CCD可以同時(shí)接收和檢測整個(gè)目標波長(cháng)范圍區的所有光
3、CCD比光電倍增管PMT有更高的量子效率
4、所有波長(cháng)同時(shí)檢測,大大縮短了檢測時(shí)間
5、測定波長(cháng)范圍:400-800nm
6、可以長(cháng)時(shí)間曝光(提高了微小樣品的檢測靈敏度)
7、如果裝置熒光激發(fā)光源,還可以測定FRET或熒光底物
與常規的分光計比較如下:
要捕獲弱光波長(cháng)內的全部變化,必須要有測定小樣品的高靈敏度的檢測裝置。常規的光度計是在把光分散后采用光電倍增管(PMT)一個(gè)個(gè)的檢測,這樣的話(huà),敏感度大大降低,同時(shí)可能會(huì )由于以下原因沒(méi)有達到一定光密度,導致樣品不能側定出光譜:
(1)PMT的定量效率本身就比CCD低
(2)測定時(shí)間短
更重要的是,如果為補償低靈敏度的不便而將掃描時(shí)間延長(cháng),冷光或熒光就會(huì )逐漸變細,反而得不償失,得不到精確的光譜。
| LumiFL-Spectro capture | 常規光度計 |
檢測器 | 冷的CCD | PMT |
檢測方式 | 成批量 | 一個(gè)一個(gè)地、順序測定 |
時(shí)間 | 短 | 長(cháng) |
目標 | 光強低的光 | 高強度光 |
樣品測量:
發(fā)光樣品——濾光片元件組——細縫元件組——衍射光譜——所有波長(cháng)的光通過(guò)冷CCD成批量檢測
1.樣品可以在石英杯或者PCR管內測定;冷光樣品(細胞或蛋白)都可以測
2.聚光鏡/濾光片:可以設定單片激發(fā)光濾片
3.細縫元件組:可以聚集樣品光
4.衍射光柵:分離樣品光
5.檢測元件:整個(gè)樣品的光被分離后的光譜可經(jīng)冷CCD同時(shí)測定;測量時(shí)間短,可以通過(guò)長(cháng)時(shí)間曝光達到提高靈敏度的效果。
舉例:
BRET樣品的測定:
當蟲(chóng)熒光素加到藍色熒光素酶Vluc和黃色熒光蛋白YFP的融合蛋白上,熒光素和酶反應產(chǎn)生能量。一部分能量轉移到YFP上,BRET反應就開(kāi)始了。如果我們插入一小段包含目的序列(KR)的短肽片段,它可以轉運酶PC1到Vluc-PC1這個(gè)復合蛋白上,識別并優(yōu)先結合YFP的肽鏈序列。用AB-1850測定這個(gè)融合物的光譜,460nm下的Vluc冷光和527nm下的YFP都發(fā)出了強光,這樣BRET反應被有力地證實(shí)了。接下來(lái),PC1加入反應體系,527nm下的光減弱了,峰值變小。這個(gè)結果可以這樣解釋?zhuān)篜C1搶先結合到復合蛋白上,切斷了能量轉移到GFP上的通路,所以BRET的效率降低,通過(guò)檢測數量的降低可以檢測PC1的活性。
生物技術(shù)領(lǐng)域的用途:
BRET或FRET用途中的評估分子設計
為完成BRET或FRET的實(shí)驗,首先需要預實(shí)驗階段的檢驗分子設計。這種情況下,用光學(xué)濾光片檢測冷光或熒光樣品不可能把樣品的全部發(fā)光波長(cháng)都檢測到,同時(shí)也不能過(guò)有效而充分地檢測到能量轉移期間波長(cháng)的變化。而如果用AB-1850,這些就不成問(wèn)題了,可以有效地進(jìn)行分子設計。
BRET或FRET:zui近這兩種技術(shù)成為熱門(mén),被廣泛應用于分析蛋白間、蛋白和核酸間的,或者對蛋白進(jìn)行修飾、剪切和空間構象改變后的功能研究。
FRET是一種現象,從激發(fā)熒光的分子(供體)產(chǎn)生的光能量激活了其它熒光分子(受體),從而受體發(fā)光。它一般發(fā)生在受體和供體間存在一定的距離和空間關(guān)系,通過(guò)測定發(fā)出的光的波長(cháng),就可以判斷FRET是否發(fā)生。
BRET 中,熒光分子(供體)被冷光分子所取代,光也不是由供體發(fā)出,而是受體被冷光分子的冷光激活。BRET 中,如果冷光底物在測定時(shí)加入,檢測就可以進(jìn)行了,所以不需要高能量的激發(fā)光源裝置。這樣就降低了對樣品的損傷。
性能參數:
1.冷光、熒光測定裝置
F值 | F3.0 |
測量波長(cháng)范圍 | 400-800nm |
逆線(xiàn)性色散 | 60nm/mm |
波長(cháng)分辨率 | 1.8nm |
重復性 | ±0.6nm |
隙縫寬度 | 0.01nm-5nm(11步) |
曝光時(shí)間 | 1/20s----60min(26步) |
光接收裝置 | 電子冷CCD |
2.光譜成像:
衍射光柵數目:1個(gè)(標準)光柵:150pc/mm
Braze 波長(cháng):500nm
3.測量樣品部分:
測定器皿:石英杯(4mm*4mm)/ 0.2ml PCR管/ 35mm 培養皿
樣品體積:10ul-100ul
瞬時(shí)冷光測定:注入孔(硅酮隔板)
激發(fā)光源的連接:FC接管(標配)
4.軟件:
功能:測量和光波數據分析
接口: USB2.0
5.體積和重量:
大?。?10mm(W)*725mm(D)*390mm(H)
重量:58kg
電源:C100v 50/60Hz 290V
6.標準配件:
LumiFL-Spectro 光捕獲系統:1臺
35mm 平皿實(shí)驗組區:1PC
方形細胞樣品區:1PC
PCR管樣品區:1
熒光測量時(shí)的濾鏡托板:1
AC繩:1
USB接線(xiàn):1
瞬時(shí)熒光測定時(shí)需要用到的試劑加樣接管:1
石英容器:1
PCR管:1袋
為瞬時(shí)測定提供的試劑加樣橡膠閥:1袋
數據分析軟件(CD版):1