無(wú)外泌體胎牛血清EXO-Free FBS Media

無(wú)外泌體胎牛血清EXO-Free FBS Media

NANOLAB品牌無(wú)外泌體胎牛血清

(EXO-Free FBS Media)

貨號：360-23

規格：50ml/瓶

保存溫度：-20℃

品牌：NANOLAB

產(chǎn)品描述：當外泌體在1980年*被發(fā)現后，其被認為是細胞排泄廢物的一種方式，近的研究發(fā)現外泌體在很多生理病理上起著(zhù)重要的作用，這些發(fā)現點(diǎn)燃了人們對細胞分泌膜泡的興趣。exosome及其他細胞外囊泡正起著(zhù)*的細胞通訊作用。在腫瘤發(fā)展過(guò)程中，exosome介導了關(guān)鍵的步驟，如刺激血管生成，削弱免疫反應，甚至參與了轉移前微環(huán)境的形成。在正常的生理過(guò)程中，exosome也起了重要作用，如胎盤(pán)exosome幫助形成對母親免疫系統的免疫抑制屏障?？傊?，在正常和病理的條件下，細胞都釋放小囊泡，以各種方式影響其他細胞。

無(wú)外泌體血清可以特異性激發(fā)一些細胞反應，表明它們可以在作為治療遞送載體方面有巨大的潛力。無(wú)外泌體血清的囊泡性質(zhì)使得它們適合作為用于藥物或核酸遞送的潛在納米載體。在這里，研究人員需要解決的問(wèn)題是，無(wú)外泌體血清的大小分布也會(huì )影響外泌體的治療潛力。

1：利用聚合物沉淀分離的外泌體比超離法的粒子分布要小。

2：劃痕實(shí)驗證實(shí)聚合物沉淀所得的小粒徑的外泌體被細胞攝取后遷移更快。

產(chǎn)品應用                         

360-23  EXO-Free FBS Media （無(wú)外泌體胎牛血清）操作手冊：

 對比

1):EXO-Free FBS Media大大降低了牛外泌體的含量

2):EXO-Free FBS Media去除了牛 CD63 外泌體

3):EXO-Free FBS Media 比超速離心FBS更*

4):EXO-Free FBS Media 具有無(wú)法檢測的牛microRNA水平

5):EXO-Free FBS Media與標準FBS的細胞生長(cháng)曲線(xiàn)幾乎*

EXO-Free FBS Media大大降低了牛外泌體的含量

使用NANOLAB品牌Exo-FBS確保您的細胞或組織培養基中的外泌體制備僅包含來(lái)自細胞的外來(lái)體，而不是來(lái)自培養基中的FBS。 ELISA和NanoSight分析均證明，與標準FBS相比，Exo-FBS中牛外來(lái)體水平顯著(zhù)降低。

NanoSight粒子分析在Exo-FBS中顯示超低外泌體殘留量

為了證明我們的Exo-FBS產(chǎn)品中外泌體的消耗，我們將標準FBS和Exo-FBS樣品1：1000稀釋?zhuān)缓笫褂肗anoSight LM10儀器分析粒徑和豐度。 標準FBS樣品顯示顯著(zhù)量的外來(lái)體大小的微泡，其中Exo-FBS外泌體耗盡的FBS樣品具有外來(lái)體顆粒的急劇減少。

四跨膜蛋白CD63蛋白是外泌體的常見(jiàn)標記物。 我們利用牛特異性抗CD63抗體開(kāi)發(fā)酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）。 在該ELISA測定中使用等體積（50μl）的標準FBS或Exo-FBS耗盡的培養基補充物。 與標準FBS相比，Exo-FBS中CD63陽(yáng)性牛外來(lái)體的量顯著(zhù)減少（繪制的結果標準化為標準FBS的信號水平）。

NANOLAB品牌Exo-FBS比超速離心FBS更清潔

通過(guò)將NanoSight顆粒計數分析與源FBS，FBS超速離心18小時(shí)和外泌體耗盡的Exo-FBS產(chǎn)品進(jìn)行比較，在NANOLAB生產(chǎn)的每批Exo-FBS上生成質(zhì)量控制數據。 所有樣品以1：100稀釋?zhuān)⒁皇饺菔占疦TA數據。

結論：

使用NANOLAB品牌不含外泌體胎牛血清，您可以確信您分離的外泌體是由培養細胞產(chǎn)生的，而不是培養基中的污染物。

NANOLAB品牌不含外泌體胎牛血清具有無(wú)法檢測的牛microRNA水平

NANOLAB品牌不含外泌體胎牛血清不僅具有大大降低的外泌體水平，不含外泌體胎牛血清中的牛microRNA在高靈敏度qPCR測定中顯示不可檢測。 用Trizol提取方法處理標準FBS和Exo-FBS培養基補充物（4ml）以回收外來(lái)體RNA。 將RNA轉化為cDNA，并使用QuantiMir系統通過(guò)qPCR測量72個(gè)單獨的牛microRNA。 在測試的72種微RNA中，12種在FBS樣品中產(chǎn)生擴增曲線(xiàn)，但在Exo-FBS樣品中沒(méi)有。

Exo-FBS與細胞生長(cháng)的標準FBS相同

Exo-FBS不僅能夠有效隔離標準FBS中存在的污染物的外泌體，它支持與標準FBS相同的生長(cháng)速率。

為了比較Exo-FBS與標準FBS中細胞的生長(cháng)速率，我們在10％標準FBS或添加10％的Exo-FBS的*培養基中培養HT1080纖維肉瘤細胞，PC-3前列腺癌細胞，MCF-7乳腺癌細胞和HEK293細胞。。 將細胞接種于10,000或20,000個(gè)細胞，然后在標準條件下在37℃，5％CO ₂下在所示培養基中培養5天。 對細胞進(jìn)行成像，計算生長(cháng)速率并觀(guān)察細胞形態(tài)。 對于在這4種細胞系中測試的標準FBS和Exo-FBS培養基，觀(guān)察到等同生長(cháng)和類(lèi)似的細胞形態(tài)。