病毒大規模培養神器-微載體 Cytodex（入門(mén)篇）

點(diǎn)擊次數：2284 更新時(shí)間：2021-07-01

病毒大規模培養神器

微載體 Cytodex

入門(mén)篇

近期疫情逐漸穩定，希望新的一年大家心寬體「胖」。因為微載體的貼壁培養工藝廣泛應用在疫苗的大規模生產(chǎn)中，接下來(lái)，咱們就聊聊病毒大規模培養的神器-微載體。那么什么是微載體？不同類(lèi)型微載體的特點(diǎn)？微載體如何操作？以及有哪些成功的應用案例呢？

圖 1 Cytodex 微載體上的 Vero 細胞（染色）

什么是 Cytodex 微載體？

Cytodex 微載體是專(zhuān)門(mén)為培養各種動(dòng)物細胞的高產(chǎn)量而開(kāi)發(fā)的，針對不同類(lèi)型動(dòng)物細胞，有 Cytodex 和 Cytopore 兩個(gè)系列（見(jiàn)圖 1），在這里詳細地給大家介紹下 Cytodex。

Cytodex 微載體（Cytodex 1&3）是基質(zhì)為葡聚糖的微球，細胞可貼附微球 2D 表面生長(cháng)，1 g 的 Cytodex1 微載體提供 4400 cm 2 的表面積給細胞貼附。 Cytodex 1幾乎適合所有貼壁細胞。 Cytodex 3表面包被膠原，適合無(wú)血清培養基培養。除標準的 Cytodex 產(chǎn)品外， Cytodex 還有經(jīng)過(guò) Gamma 射線(xiàn)滅菌的產(chǎn)品，無(wú)需繁瑣的水化滅菌，可以直接使用。

Cytodex 微載體的特點(diǎn)

①表面特征經(jīng)過(guò)優(yōu)化，適于細胞高效粘附和伸展；

②大小和密度經(jīng)過(guò)優(yōu)化，有利于均勻懸浮，適于寬范圍的細胞優(yōu)良生長(cháng)和高產(chǎn)；

③基質(zhì)是生物惰性的，為攪拌培養提供了一個(gè)堅硬但是非剛性的底物；

④透明，貼附的細胞用簡(jiǎn)單的顯微鏡就能觀(guān)察到。

⑤可放大性好。動(dòng)物細胞懸浮培養已經(jīng)達到 15,000 L 規模，貼壁依賴(lài)型細胞的微載體培養已經(jīng)達到 6,000 L 規模。

表 1 微載體的詳細參數

微載體有哪些應用？

微載體的應用領(lǐng)域非常廣泛，疫苗、單克隆抗體、天然和重組蛋白，還有前景廣闊的免疫細胞治療領(lǐng)域。

歐洲和世界范圍內的許多國家的絕大多數減毒或滅活疫苗類(lèi)型的人用和獸用疫苗都在使用微載體進(jìn)行生產(chǎn)（見(jiàn)表 2）?；谖⑤d體生產(chǎn)的疫苗包括脊髓灰質(zhì)炎、風(fēng)疹、狂犬病、流感、日本腦炎（乙型腦炎）、呼吸道合胞病毒（RSV）和口蹄疫（FMD）疫苗等。與其他細胞培養工藝相比，微載體培養工藝可以提高產(chǎn)量，降低成本，并減少污染。Sinskey 等人觀(guān)察，使用微載體培養工藝，新德畢斯病毒（Sindbis virus）的單位體積產(chǎn)量可以達到滾瓶培養的 50 多倍。

表 2 微載體在疫苗工業(yè)中的應用狀況

Cytodex 微載體

可以培養哪些細胞？

實(shí)際上，所有培養的動(dòng)物細胞類(lèi)別都可培養。Cytodex1 微載體是一般應用的細胞培養表面，凡是能在體外貼壁的細胞將都能夠粘附到 Cytodex1 微載體上。Cytodex3 也為許多在玻璃或者塑料表面粘附或者功能較弱的細胞類(lèi)型提供了一個(gè)改良的培養表面。

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表 3 按組織分類(lèi)的在 Cytodex 微載體上培養的細胞類(lèi)型列表

哺乳動(dòng)物、禽類(lèi)、魚(yú)和昆蟲(chóng)細胞已經(jīng)在 Cytodex 微載體上培養, 它們具有廣泛的組織來(lái)源，包括原代細胞，二倍體細胞株和傳代/轉化的細胞系。雜交細胞系和腫瘤來(lái)源的細胞系也可以，根據相關(guān)統計大約有 150 多種細胞可以在 Cytodex 微載體上培養。

快看看你的細胞

可以在微載體上培養嗎？

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